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張志敏1987銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
沙門氏菌總蛋白的提��！急需幫助！
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我的提取步驟： 1、將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期的細(xì)菌移至離心管，8000轉(zhuǎn)離心15min； 2、用5%山梨醇重懸清洗4次； 3、按每20mg濕重菌體加500ul裂解液，超聲裂解，超聲條件300w，10s/10s，直至變清； 4、4度，18000轉(zhuǎn)離心60min，取上清快速轉(zhuǎn)到預(yù)冷的管中，置于-80度儲(chǔ)存。 裂解液配方：尿素 4.2g 硫脲 1.52g CHAPS 0.4g 加水至10ml，溶解，分裝成1ml，10管 臨用前加入0.0098g/ml 的DTT 和蛋白酶抑制劑10ul/ml 請(qǐng)問我哪里不合適，導(dǎo)致蛋白質(zhì)量不好，跑出二維電泳的圖一直不好！ 請(qǐng)各位大俠指教，謝謝！  |
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0703化學(xué)求調(diào)劑，各位老師看看我�。�！
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weebug
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2樓2014-09-16 21:16:35
張志敏1987
銅蟲 (初入文壇)
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3樓2014-09-17 11:11:43
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4樓2014-09-17 11:51:37
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