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wencaoxi新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請問western blot檢測信號通路時，未活化和活化樣品的活化水平如何做出顯著性差異？ 已有1人參與
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本人做western blot檢測信號通路（不限哪一種通路分子）時，總是做不出文獻中的差異顯著的活化條帶，很苦惱 。文獻中，未活化樣品的條帶幾乎看不見，而活化樣品一般可見隨著時間進程會有明顯的增強（或減弱），但這對于我而言實在是可望而不可及的結(jié)果。我用抑制劑處理時可以看到條帶被顯著抑制，但正常培養(yǎng)的情況下信號通路都是被活化的，根本沒看到過未刺激時不活化的狀況。 是不是需要改變培養(yǎng)條件比如用無血清培養(yǎng)基處理24小時？做WB時是不是要盡量縮短曝光時間和降低抗體使用濃度？有什么訣竅在里面呢？ 我感覺對信號通路的活化還有些根本認識上的問題，可能是造成做不出理想結(jié)果的原因。懇請各位大俠指導(dǎo)！ |
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polly2879
新蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 細胞死亡
2樓2015-01-19 14:40:11
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