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[交流]
關于基因克隆和植物表達載體的一些問題
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我想克隆一個基因連接到植物表達載體上，轉化植物，分別從基因組和CDNA上克隆。 1、直接從外顯子邊緣擴增，比如說只擴增CDS區(qū)，會不會有轉化以后不能正常表達的問題？因為我聽說，必須要從非編碼區(qū)擴增，不然可能不表達。 2、如果設計引物的時候要往兩端的非編碼區(qū)UTR進行，那么3'-UTR和5'-UTR大概要多長？各50-100bp左右夠嗎？ 3、如果不需要擴增UTRSs，那么為了保證測序結果的準確性，需要在我的目的基因兩端都加上一點序列嗎？因為說公司的測序結果在測序樣兩端的堿基結果存在一定的錯誤率，所以為了驗證我的基因是不是完全正確，需要兩端多加一點序列，方便對測序結果進行比對。 |
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2樓2017-01-11 14:21:02
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