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861565768鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于血樣處理的一些問(wèn)題
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綜合文獻(xiàn)，血樣預(yù)處理如下： 250μL凍融血漿 使用前加入25μL 6M高氯酸和125μL乙腈�；旌衔镌诰郾┕苤惺褂眯郎u混合器充分混合2min，然后5℃下靜置30min，然后5℃條件下20000×g離心5min。將上清液和100μL 0.75M的碳酸鉀適當(dāng)混合30S.5℃ 下20000×g離心5min除去離心管中不溶的高氯酸鉀。 問(wèn)題：1、血樣在處理液中所占比例比較高，怕提取的不完全，該怎么改進(jìn) 2、樣品最后需要再過(guò)濾之后上HPLC么，生物樣品畢竟不干凈，分析柱也不便宜 3、內(nèi)標(biāo)物在什么時(shí)候加，加多少合適呢（應(yīng)該是直接先加在血漿里吧） 4、這里面所有物質(zhì)的體積加入量有沒(méi)有什么遵循的原則 開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前想先紙上談兵，希望各位大神不要見(jiàn)笑，幫幫小弟！ 不甚感謝 |
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