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[交流]
如何分開his融合蛋白和去標(biāo)簽蛋白質(zhì) 已有2人參與
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| 我的蛋白質(zhì)加了sumo標(biāo)簽，融合蛋白純化的濃度還挺高的，然后去標(biāo)簽再過鎳柱，理想狀態(tài)是目的蛋白流穿，sumo標(biāo)簽和未被完全切開的融合蛋白結(jié)合在鎳柱上，剛開始做的時(shí)候用磷酸緩沖液平衡鎳柱，結(jié)果蛋白全結(jié)合在鎳柱上了，后來用20mM咪唑平衡鎳柱，目的蛋白和標(biāo)簽是分開了，可是未被完全切割的融合蛋白竟然和目的蛋白一起流出來了，請問下這融合蛋白帶了his標(biāo)簽怎么第二次過鎳柱就不結(jié)合了呢，如何將融合蛋白與目的蛋白分開呢。 |
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joblee
木蟲 (正式寫手)
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2樓2014-10-15 21:55:46
3樓2014-11-27 13:15:04
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