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cyanobacter金蟲 (小有名氣)
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[求助]
用CFP和YFP做FRET,但是CFP和YFP出現(xiàn)串色是什么原因?
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各位蟲友,大家好,我最近在構(gòu)建FRET的表達質(zhì)粒,遇到一個問題。 我用CFP和YFP先分別在細胞中表達,然后用激光共聚焦觀察,可是很奇怪,CFP在自己的激發(fā)波長433nm下看不到熒光,需要先用紫外365nm照一會兒,再轉(zhuǎn)到CFP的通道(激發(fā)433nm,發(fā)射476nm)才能看到熒光。 同樣YFP也是這樣,需要先轉(zhuǎn)到紫外通道照一會,然后再用YFP的通道看能看到明顯的熒光,單獨只用YFP的通道也看不到。 請問各位蟲友又遇到過這種情況嗎?是什么原因?qū)е逻@種情況,如果都需用紫外來激發(fā)的話,那FRET也就沒法做了。請大家?guī)兔Π。? |
金蟲 (小有名氣)
新蟲 (著名寫手)
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