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cyanobacter金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
用CFP和YFP做FRET，但是CFP和YFP出現(xiàn)串色是什么原因？
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各位蟲(chóng)友，大家好，我最近在構(gòu)建FRET的表達(dá)質(zhì)粒，遇到一個(gè)問(wèn)題。 我用CFP和YFP先分別在細(xì)胞中表達(dá)，然后用激光共聚焦觀察，可是很奇怪，CFP在自己的激發(fā)波長(zhǎng)433nm下看不到熒光，需要先用紫外365nm照一會(huì)兒，再轉(zhuǎn)到CFP的通道（激發(fā)433nm，發(fā)射476nm）才能看到熒光。 同樣YFP也是這樣，需要先轉(zhuǎn)到紫外通道照一會(huì)，然后再用YFP的通道看能看到明顯的熒光，單獨(dú)只用YFP的通道也看不到。 請(qǐng)問(wèn)各位蟲(chóng)友又遇到過(guò)這種情況嗎？是什么原因?qū)е逻@種情況，如果都需用紫外來(lái)激發(fā)的話，那FRET也就沒(méi)法做了。請(qǐng)大家?guī)兔Π。? |
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3樓2014-10-17 19:37:51
cyanobacter
金蟲(chóng) (小有名氣)
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2樓2014-10-17 16:02:42
醉石郝寶寶
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