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| 本帖產(chǎn)生 1 個 博學EPI ,點擊這里進行查看 | ||
CheminfoX金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助神經(jīng)氨酸酶抑制劑抑制常數(shù)的詳細測定方法,謝謝
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求大神指導指導下面兩個問題,越具體越好,最好有參考文獻,非常感謝: 1. 神經(jīng)氨酸酶抑制劑抑制常數(shù)Ki的詳細測定方法; 2. 探究目標化合物與陽性對照物的神經(jīng)氨酸酶抑制活性是否存在協(xié)同作用的實驗方案設計; |
| 有山大兩篇藥化博士論文,很不錯的。希望對你有所幫助。 |

金蟲 (小有名氣)
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山東大學劉瑜和謝元超這兩篇論文很好,我是看了之后想到這兩個問題的,但里面Ki測定方法不夠詳細。江宏磊這一篇文章講的比較詳細。第二個問題,我查了文獻,沒怎么懂協(xié)同作用的聯(lián)合指數(shù)(CI)是如何測出來的,看了一篇下面這篇文章更是覺得迷糊:Chou T C. Drug combination studies and their synergy quantification using the Chou-Talalay method[J]. Cancer research, 2010, 70(2): 440-446.。求指導 |
金蟲 (小有名氣)
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神經(jīng)氨酸酶抑制活性測定在Potier方法 [8] 的基礎 上進行了改進。測定在96孔熒光酶標板中進行,反 應體系總體積為100μL,樣品用DMSO溶解。步驟如 下:每孔依次加入33mmol/L MES緩沖液(含5mmol/L CaCl 2 ,pH6.5)70μL 、待測樣品(陰性對照為DMSO, 陽性對照為扎那米韋)10μL、0.3U/mL神經(jīng)氨酸酶 10μL,振蕩混勻1min,37℃孵育3min,測定熒光值 F 1 。然后加入80mmol/L底物MUNANA 10μL,充分 混勻,37℃反應15min后測定熒光值F 2 。設定參數(shù): 激發(fā)光E x =355nm,發(fā)射光E m =460nm。計算抑制率, 公式為:抑制率(%)=[(F 2 -F 1 ) 對照 -(F 2 -F 1 ) 樣品 /(F 2 -F 1 ) 對照 ]× 100。扎那米韋(0.1mg/mL)抑制率為53.2% |

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