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CheminfoX金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助神經(jīng)氨酸酶抑制劑抑制常數(shù)的詳細(xì)測定方法，謝謝
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求大神指導(dǎo)指導(dǎo)下面兩個問題，越具體越好，最好有參考文獻(xiàn)，非常感謝： 1. 神經(jīng)氨酸酶抑制劑抑制常數(shù)Ki的詳細(xì)測定方法； 2. 探究目標(biāo)化合物與陽性對照物的神經(jīng)氨酸酶抑制活性是否存在協(xié)同作用的實驗方案設(shè)計； |
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2樓2014-10-17 17:25:49
CheminfoX
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3樓2014-10-20 10:03:00
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【答案】應(yīng)助回帖
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CheminfoX: 金幣+10, ★有幫助, 雖然不對，但至少查了，謝謝 2014-10-22 20:18:11
CheminfoX: 金幣+10, ★有幫助, 雖然不對，但至少查了，謝謝 2014-10-22 20:18:11
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神經(jīng)氨酸酶抑制活性測定在Potier方法 [8] 的基礎(chǔ) 上進(jìn)行了改進(jìn)。測定在96孔熒光酶標(biāo)板中進(jìn)行，反 應(yīng)體系總體積為100μL，樣品用DMSO溶解。步驟如 下：每孔依次加入33mmol/L MES緩沖液(含5mmol/L CaCl 2 ，pH6.5)70μL 、待測樣品(陰性對照為DMSO， 陽性對照為扎那米韋)10μL、0.3U/mL神經(jīng)氨酸酶 10μL，振蕩混勻1min，37℃孵育3min，測定熒光值 F 1 。然后加入80mmol/L底物MUNANA 10μL，充分 混勻，37℃反應(yīng)15min后測定熒光值F 2 。設(shè)定參數(shù)： 激發(fā)光E x =355nm，發(fā)射光E m =460nm。計算抑制率， 公式為：抑制率(%)=[(F 2 -F 1 ) 對照 -(F 2 -F 1 ) 樣品 /(F 2 -F 1 ) 對照 ]× 100。扎那米韋(0.1mg/mL)抑制率為53.2% |
4樓2014-10-22 20:01:20
奔馬123
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【答案】應(yīng)助回帖
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CheminfoX: 回帖置頂 2014-10-23 21:35:55
CheminfoX: 金幣+90, 博學(xué)EPI+1, ★★★很有幫助, 非常感謝，很有幫助。 2014-10-23 22:13:53
CheminfoX: 回帖置頂 2014-10-23 21:35:55
CheminfoX: 金幣+90, 博學(xué)EPI+1, ★★★很有幫助, 非常感謝，很有幫助。 2014-10-23 22:13:53
| 有山大兩篇藥化博士論文，很不錯的。希望對你有所幫助。 |
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歡迎監(jiān)督和反饋：小木蟲僅提供交流平臺，不對該內(nèi)容負(fù)責(zé)。
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- 附件 2 : readonline.caa
- 附件 3 : 海洋來源鏈霉菌FIM090041產(chǎn)生的神經(jīng)氨酸酶抑制劑_江宏磊(1).pdf
2014-10-22 20:18:48, 23.14 M
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5樓2014-10-22 20:16:11
CheminfoX
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CheminfoX: 回帖置頂 2014-10-23 22:21:15
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山東大學(xué)劉瑜和謝元超這兩篇論文很好，我是看了之后想到這兩個問題的，但里面Ki測定方法不夠詳細(xì)。江宏磊這一篇文章講的比較詳細(xì)。第二個問題，我查了文獻(xiàn)，沒怎么懂協(xié)同作用的聯(lián)合指數(shù)(CI)是如何測出來的，看了一篇下面這篇文章更是覺得迷糊：Chou T C. Drug combination studies and their synergy quantification using the Chou-Talalay method[J]. Cancer research, 2010, 70(2): 440-446.。求指導(dǎo)  |
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2014-10-23 22:20:50, 385.71 K
6樓2014-10-23 22:21:04
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