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額紀(jì)木蟲 (初入文壇)
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[求助]
XcmI酶切后不見小片段 已有1人參與
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自己構(gòu)建了一個(gè)載體，在載體的LacZ兩端引入了XcmI酶的酶切位點(diǎn)，經(jīng)過測序證實(shí)過了。 最近重新抽過質(zhì)粒，拿XcmI酶來切的時(shí)候，切完之后跑電泳，卻看不到切下來的lacZ片段，只有剩下的大片段，純化之后做連接，轉(zhuǎn)化后也是沒有菌落。 之前有一次，是可以看到LacZ的片段的，大概在600多bp的位置。而且成功重組了目的基因進(jìn)去。 用的NEB的XcmI酶，37度45分鐘，65度滅活20分鐘。 |
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2樓2014-10-17 10:35:04
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