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分析-Legion新蟲 (小有名氣)
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[求助]
SYBR Green I 會與ExoIII 之間會相互影響嗎
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1.在緩沖液中加入SYBR Green I 可以檢測到較高的熒光強度(1379 au.);當在緩沖液中加入ExoIII,水浴37℃后再加入SYBR Green I 十分鐘后檢測熒光強度時只有198.4.這可以說明ExoIII會和SYBR Green I反應嗎? 2..我在加入Exo III 37攝氏度培育半個小時后 又將這個酶滅活了20min ,最后加入染料SG I,十分鐘后檢測熒光,熒光值還是很低,只有100多。應該怎么樣才可以降低Exo III對SYBR Green I 的影響呢? |

鐵桿木蟲 (正式寫手)

鐵桿木蟲 (小有名氣)

新蟲 (小有名氣)
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我做的是讓SYBR Green I 嵌入G四聯(lián)體里面發(fā)光,實驗證明G四聯(lián)體越多,加入相同量的SYBR Green I 得到的熒光強度也是越大的。 另外,我做的另一個實驗:在形成G四聯(lián)體后(G四濃度不斷增加)加入相同量的Exo III 培育(目的是想證明Exo III不能水解G四聯(lián)體),再加入相同量的SYBR Green I 培育就不會有逐漸增強的熒光強度,實驗現(xiàn)象是在低濃度范圍熒光強度都很低(接近于水平線),在中間濃度時(5mM)熒光強度達到最高值,然后隨著G四濃度的增大,熒光強度是不斷降低的。 這個實驗我已經(jīng)重復了很多次,每次都是這種現(xiàn)象,這是什么原因呢,是因為Exo III可能已經(jīng)剪切了G四聯(lián)體嗎? |

鐵桿木蟲 (小有名氣)

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