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wmhhc新蟲 (初入文壇)
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[求助]
液相雜峰求助 已有3人參與
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很老的HPLC，最近一直在洗，終于把基線洗平穩(wěn)了。但是進(jìn)樣的話還是有問題： 1.用100%甲醇做流動(dòng)相，進(jìn)純異丙醇、純水都會(huì)在2-4分鐘產(chǎn)生一系列雜峰，進(jìn)純乙腈會(huì)產(chǎn)生一個(gè)單一的很高的峰。但進(jìn)甲醇就雜峰會(huì)小很多，基本可以忽略。 2.用100%乙腈做就動(dòng)向，進(jìn)純乙腈幾乎沒有雜峰，但進(jìn)純甲醇會(huì)有一個(gè)很高的雜峰。 3.用50%甲醇和50%乙腈做流動(dòng)相，進(jìn)純甲醇、純乙腈都會(huì)產(chǎn)生一個(gè)很高的雜峰，進(jìn)純水會(huì)有一系列的雜峰。 請(qǐng)問下這種情況，應(yīng)該怎么檢查是哪一部分污染了呢？ 還有一個(gè)問題是：使用某種單一流動(dòng)相的時(shí)候，柱壓很穩(wěn)，基線很平，但一旦使用兩種流動(dòng)相混合，走1小時(shí)，柱壓仍會(huì)有4-5bar的波動(dòng)，基線也有較大波動(dòng)。請(qǐng)問下這是泵的問題嗎？還是沒有平衡好？ update: 感覺甲醇流動(dòng)相，進(jìn)乙腈的峰和乙腈流動(dòng)相進(jìn)甲醇的峰，以及50%甲醇50%乙腈流動(dòng)相進(jìn)甲醇或者乙腈的峰都是溶劑峰。這樣會(huì)不會(huì)是我進(jìn)樣系統(tǒng)污染，只有異丙醇和水才會(huì)洗出雜峰呢？ 非常感謝！ |
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daisyzhangwei
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 如果是等度洗脫，建議樓主用乙腈和水的流動(dòng)相，如果是檢測(cè)苯酚，樓主選用的波長不是很合理，我估計(jì)波長應(yīng)該選擇215nm左右，當(dāng)然這要樓主產(chǎn)品主峰和雜質(zhì)的吸收而選定；最好用梯度洗脫，還是用乙腈和誰做流動(dòng)相，因?yàn)橐译娴奈赵?90nm，溶劑干擾較小，甲醇的吸收再205nm，溶劑干擾較大，如果是自動(dòng)進(jìn)樣，污染的可能性較小，如果是手動(dòng)進(jìn)樣，那就要注意進(jìn)樣閥的污染和進(jìn)樣器的污染。 |
6樓2014-10-25 09:20:30
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7樓2014-10-25 14:29:00
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8樓2014-10-27 10:34:38
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