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圣主魂新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
單引物擴(kuò)增 已有2人參與
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測(cè)序公司說(shuō)是典型的單引物擴(kuò)增產(chǎn)物，只有上游引物：C（GGATCC）ATGCCCCCTCGC引物起作用，引物需要重新設(shè)計(jì) 我不明白的是即使是單引物擴(kuò)增，也應(yīng)該會(huì)有部分可以匹配上才對(duì)，可結(jié)果一點(diǎn)也不能和已知序列匹配。而且我送樣前做的PCR和雙酶切都是可以的。哎.....做個(gè)實(shí)驗(yàn)各種狀況都能遇見(jiàn)，我也是醉了........ 我是用的PMD19-T載體，上游引物：C（GGATCC）ATGCCCCCTCGC 括號(hào)內(nèi)為bamH1內(nèi)切酶位點(diǎn)。 下游引物：C（GAGCTC）CTAGCTCACGGTCTTGCC 括號(hào)內(nèi)為Sac I內(nèi)切酶位點(diǎn)。退火溫度61度。 |
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2樓2014-10-29 16:49:13
圣主魂
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3樓2014-10-31 16:03:24
dongdekun
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4樓2014-11-02 12:45:00
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5樓2014-11-03 17:08:14
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6樓2014-11-03 23:04:25
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