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單引物擴(kuò)增 已有2人參與
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測序公司說是典型的單引物擴(kuò)增產(chǎn)物,只有上游引物:C(GGATCC)ATGCCCCCTCGC引物起作用,引物需要重新設(shè)計 我不明白的是即使是單引物擴(kuò)增,也應(yīng)該會有部分可以匹配上才對,可結(jié)果一點也不能和已知序列匹配。而且我送樣前做的PCR和雙酶切都是可以的。哎.....做個實驗各種狀況都能遇見,我也是醉了........ 我是用的PMD19-T載體,上游引物:C(GGATCC)ATGCCCCCTCGC 括號內(nèi)為bamH1內(nèi)切酶位點。 下游引物:C(GAGCTC)CTAGCTCACGGTCTTGCC 括號內(nèi)為Sac I內(nèi)切酶位點。退火溫度61度。 |
新蟲 (初入文壇)
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