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[求助] PCR產(chǎn)物放置-20℃一段時(shí)間后，條帶發(fā)生改變的原因？已有7人參與

十月中旬的樣子做的PCR，凝膠電泳檢測(cè)之后，條帶是單一的大概在1000左右，是需要的目的條帶，如圖1。
   由于中間帶本科生實(shí)驗(yàn)，耽誤了些時(shí)間，一直將PCR產(chǎn)物放置-20℃保存。
   昨天將之前保存的PCR產(chǎn)物拿出來(lái)重新進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)目的條帶只有400了，如圖2，左一和左二，都是1500的marker。
   圖二的左三到左七都是用與之前做PCR同樣的體系，同樣的引物，同樣的模板進(jìn)行PCR的，結(jié)果條帶也只有400.
   弄得我現(xiàn)在一頭霧水，都不知道是啥原因，求各位幫忙解答一下。

圖2.jpg

PCR產(chǎn)物放置-20℃一段時(shí)間后，條帶發(fā)生改變的原因？-1

圖1.jpg

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1樓 2014-10-29 11:42:25

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2樓2014-10-29 11:48:05

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yuyxwr

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7樓2014-10-29 21:52:26

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Ethanxia

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wu-ke-da(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-10-30 19:18:21

一方面考慮降解，另一方面考慮超級(jí)結(jié)構(gòu)。嘗試一下55度孵育15分鐘再點(diǎn)樣跑膠。

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10樓2014-10-30 11:58:36

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小冀-

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kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2014-10-30 11:29:51

會(huì)被降解，我們這里這測(cè)過(guò)濃度，會(huì)有所降低，但沒(méi)有跑過(guò)膠，總感覺(jué)你的片段減少的太多了···

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3樓2014-10-29 13:11:28

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3樓: Originally posted by 小冀- at 2014-10-29 13:11:28
會(huì)被降解，我們這里這測(cè)過(guò)濃度，會(huì)有所降低，但沒(méi)有跑過(guò)膠，總感覺(jué)你的片段減少的太多了···

換個(gè)marker試了一下，發(fā)現(xiàn)條帶又在700左右，真是要瘋了

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4樓2014-10-29 17:22:19

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4樓: Originally posted by wu-ke-da at 2014-10-29 17:22:19
換個(gè)marker試了一下，發(fā)現(xiàn)條帶又在700左右，真是要瘋了...

要不然你直接往下做吧··

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5樓2014-10-29 21:17:04

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5樓: Originally posted by 小冀- at 2014-10-29 21:17:04
要不然你直接往下做吧··...

這都可以，，，，，

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6樓2014-10-29 21:39:04

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kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2014-10-30 11:29:56

會(huì)不會(huì)被降解了啊，雖然我沒(méi)有碰到過(guò)，但是我總覺(jué)得-20度的冰箱開(kāi)關(guān)比較頻繁，萬(wàn)一有人在里面找個(gè)東西，花了一些時(shí)間，而且pcr產(chǎn)物量又比較少，很容易就溶解了。后來(lái)我就把提的東西都放在-80度保存了。以防萬(wàn)一了。

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笨鳥(niǎo)先飛&早起的鳥(niǎo)兒有蟲(chóng)吃！

8樓2014-10-30 09:14:21

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6樓: Originally posted by wu-ke-da at 2014-10-29 21:39:04
這都可以，，，，，...

恩，不能總跑電泳吧···

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9樓2014-10-30 11:50:06

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