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求助 毛狀根一直誘導不出 求大神指導 已有6人參與
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如題 毛狀根誘導已經(jīng)做了差不多兩個月了，還是沒什么結果，想請教一下有做過毛狀根誘導的大神。我們的步驟是這樣的，外植體是冬凌草，是香茶菜科的植物，菌種是在華南菌種保藏中心買的atcc11325，用ynb培養(yǎng)基培養(yǎng)出來的，誘導方法是先把葉片從外植體切下，接到培養(yǎng)基上黑暗預培養(yǎng)2d以上（培養(yǎng)基有用ms還有誘導愈傷組織的培養(yǎng)基），菌種買來后經(jīng)過三次繼代活化后劃平板挑單菌落，搖出來后甘油保種，要侵染之前2d先活化一次，再用錐形瓶搖，接種量為百分之1，侵染時用ms培養(yǎng)液把其稀釋到od600=0.4 加入AS母液使其終濃度為100umol/L ，侵染30min，侵染后放回原培養(yǎng)基共培養(yǎng)1d，之后就用400cef的除菌培養(yǎng)基除菌，但是等了兩個星期以上都沒有出現(xiàn)毛狀根，不過邊緣有愈傷組織生長。請問我們的實驗步驟有沒有問題？我們初步分析有可能是菌種問題，請問該菌株的侵染是否有種屬的選擇性？虛心請教，先謝謝各位了 |
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4樓2014-11-03 22:39:10
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