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[求助]
怎么優(yōu)化PCR體系 已有2人參與
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目的片段：1200bp 反應體系：cDNA:1ug 引物濃度：250nmol/l 氯化鎂：1.5mmol/l Taq酶：0.5U dNTP:200umol/l 循環(huán)體系：95℃，5min; 95℃,30s; 44℃~52℃:30s; 72℃:1min30s 引物給出的Tm值最小為49℃，我58℃、60℃都跑過，但是結果都是只有引物二聚體。 引物為師兄幫忙設計，老板說沒問題，上下游引物中都含有TTAATTAA酶切位點。 請教各位高手，體系還需要怎么優(yōu)化？ |
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劉芬玲
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5樓2014-10-31 20:08:31
6樓2014-10-31 22:02:45
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