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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » cdna-aflp
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NSDSKY_LZM金蟲 (小有名氣)
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| 請問大家用cDNA-aflp法，跑聚丙烯酰胺凝膠用的什么電泳槽��？多大的膠板？ |
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dongdekun
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【答案】應助回帖
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感謝參與，應助指數 +1
NSDSKY_LZM(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-11-05 14:20:41
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NSDSKY_LZM(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-11-05 14:20:41
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1）AFLP用測序膠電泳槽，尿素變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（Ura-PAGE）。下面是我們用的電泳槽技術參數： 玻璃面積（W×L）：380×320（mm） 凝膠面積（W×L）：350×300（mm） 凝膠厚度：0.4（mm） 樣品通量：（0.4mm厚）68鯊魚齒；（0.4mm厚）100鯊魚齒（選配） 緩沖液容積：～1500（ml） 外形尺寸（L×W×H）：406×176×400（mm） 2）一般Ura-Page的時候，我是不放Marker的；找到差異后，回收條帶，PCR擴增，再用瓊脂糖電泳，點Maker看大小，或者直接測序。普通Marker變性也可以用于參考，但經驗表明不是非常準確。 3）cDNA-AFLP，假陽性非常非常高，有條件建議使用更先進的技術，有money直接交給公司來做。 |
3樓2014-11-03 12:39:25
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7樓2014-11-05 12:35:07
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8樓2014-11-05 18:31:26
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