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NSDSKY_LZM金蟲 (小有名氣)
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| 請(qǐng)問(wèn)大家用cDNA-aflp法,跑聚丙烯酰胺凝膠用的什么電泳槽?多大的膠板? |
叮叮當(dāng)當(dāng)淘貼集 |
新蟲 (初入文壇)
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1)AFLP用測(cè)序膠電泳槽,尿素變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Ura-PAGE)。下面是我們用的電泳槽技術(shù)參數(shù): 玻璃面積(W×L):380×320(mm) 凝膠面積(W×L):350×300(mm) 凝膠厚度:0.4(mm) 樣品通量:(0.4mm厚)68鯊魚齒;(0.4mm厚)100鯊魚齒(選配) 緩沖液容積:~1500(ml) 外形尺寸(L×W×H):406×176×400(mm) 2)一般Ura-Page的時(shí)候,我是不放Marker的;找到差異后,回收條帶,PCR擴(kuò)增,再用瓊脂糖電泳,點(diǎn)Maker看大小,或者直接測(cè)序。普通Marker變性也可以用于參考,但經(jīng)驗(yàn)表明不是非常準(zhǔn)確。 3)cDNA-AFLP,假陽(yáng)性非常非常高,有條件建議使用更先進(jìn)的技術(shù),有money直接交給公司來(lái)做。 |
銀蟲 (正式寫手)
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