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HDAC抑制劑Belinostat的研究進(jìn)展 已有2人參與
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一、 HDAC簡介 組蛋白去乙�；�(histone deacetylase,HDAC)是一類蛋白酶,對染色體的結(jié)構(gòu)修飾和基因表達(dá)調(diào)控發(fā)揮著重要的作用。一般情況下,組蛋白的乙�；欣贒NA與組蛋白八聚體的解離，核小體結(jié)構(gòu)松弛，從而使各種轉(zhuǎn)錄因子和協(xié)同轉(zhuǎn)錄因子能與DNA結(jié)合位點(diǎn)特異性結(jié)合，激活基因的轉(zhuǎn)錄。在細(xì)胞核內(nèi)，組蛋白乙酰化與組蛋白去乙酰化過程處于動態(tài)平衡，并由組蛋白乙�；D(zhuǎn)移酶（histone acetyltransferase, HAT）和組蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase, HDAC）共同調(diào)控。HAT將乙酰輔酶A的乙酰基轉(zhuǎn)移到組蛋白氨基末端特定的賴氨酸殘基上，HDAC使組蛋白去乙酰化，與帶負(fù)電荷的DNA緊密結(jié)合，染色質(zhì)致密卷曲，基因的轉(zhuǎn)錄受到抑制。 二、 信號通路圖 三、 抑制劑Belinostat 生理活性研究：Belinostat按10mg/kg劑量處理A2780和A2780/cp70 移植瘤，明顯延遲腫瘤生長，但是對動物體重沒有影響。 在鼠膀胱細(xì)胞中，Belinostat也誘導(dǎo)p21WAF1, HDAC 核心和細(xì)胞通訊基因。 Belinostat按100mg/kg劑量單獨(dú)處理A2780移植瘤，產(chǎn)生抗癌功效，腫瘤抑制率（TGI）達(dá)47% ，這種抑制存在劑量依賴性。100 mg/kg Belinostat和40 mg/kg Carboplatin聯(lián)用可以延遲腫瘤生長，從18.6 天到22.5 天。 Bortezomib和Belinostat聯(lián)用，明顯抑制腫瘤，此外，作用于攜帶抗Bortezomib UMSCC-11A移植瘤的鼠顯示腸胃毒性 。 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：腫瘤細(xì)胞系(A2780, A2780/cp70, 2780AD, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3，和HS852) 按8×104個細(xì)胞/25 cm2 瓶接種在5 mL 培養(yǎng)基中，溫育48小時。用Belinostat (0.016 到 10 μm)處理細(xì)胞24小時。1 mL 胰蛋白酶/EDTA加到培養(yǎng)瓶中。細(xì)胞分離后，加入1 mL培養(yǎng)基，細(xì)胞再次懸浮。稀釋細(xì)胞，按0.5-2×103個細(xì)胞/皿移到6cm Petri皿中。37oC下溫育10到15天。用PBS沖洗細(xì)胞，溶于甲醇，用結(jié)晶紫染色，計(jì)數(shù)大于50個細(xì)胞的群落。通過IC50值計(jì)算敏感度。 |
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