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061719新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助,冰凍組織是否可以用流式檢測細(xì)胞周期? 已有2人參與
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| 如題,我想要吧-80保存的組織,經(jīng)過酶消化處理成單細(xì)胞,然后用流式檢測處于各個(gè)細(xì)胞分裂時(shí)期的細(xì)胞總量,不知道是否可行?用流式可以檢測嗎? |

金蟲 (小有名氣)
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很少見用組織來測周期的。既然問題提出來了,就分析一下吧: 1)凍存,凍存組織的條件能夠保證細(xì)胞結(jié)構(gòu)不被破壞嗎?培養(yǎng)細(xì)胞當(dāng)然可以-80或液氮凍存,周期固定是在-20的70%乙醇中。與之相比凍存細(xì)胞取出來消化后結(jié)構(gòu)如何,你可以先做一下,在顯微鏡下觀察,也可以借助染色確保細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整和形態(tài)基本正常。 2)消化,組織細(xì)胞會(huì)比較粘稠,消化后需要用尼龍膜過濾。 3)固定,前面都沒問題的話,組織細(xì)胞應(yīng)該也需要固定。 前面一切順利的話,后續(xù)操作與培養(yǎng)細(xì)胞相同?紤]不周的地方請(qǐng)補(bǔ)充。 |
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