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Devil_Jimmy銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
細(xì)胞突然就不長(zhǎng)了 求細(xì)胞達(dá)人指導(dǎo)！��！有圖 已有8人參與
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我養(yǎng)的是髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞株，本來(lái)一直長(zhǎng)的很好的，長(zhǎng)的很快的，正常分瓶培養(yǎng)，基本一天就滿，最多兩天 加藥預(yù)實(shí)驗(yàn)都做好了，就準(zhǔn)備正式開(kāi)始處理了，但是突然細(xì)胞就停止生長(zhǎng)了，種六孔板后加藥后，第二天發(fā)現(xiàn)細(xì)胞幾乎沒(méi)長(zhǎng)， 死細(xì)胞飄了不少，之后天天換液觀察兩天，細(xì)胞幾乎不生長(zhǎng)，確切的說(shuō)是長(zhǎng)的都是死的，或者也許是死的跟長(zhǎng)的速度相當(dāng)， 反正細(xì)胞數(shù)量增加相當(dāng)緩慢，實(shí)驗(yàn)沒(méi)辦法繼續(xù)了， 于是換了血清，配置了新的培養(yǎng)液，重新復(fù)蘇細(xì)胞養(yǎng)，但是奇怪的是新復(fù)蘇的細(xì)胞只有很少部分貼壁，換液培養(yǎng)好幾天也是幾乎不見(jiàn)生長(zhǎng)， 繼續(xù)復(fù)蘇4瓶細(xì)胞，情況相同，是在頭疼，找不到原因， 有一點(diǎn)值得提的是，自從前幾天加藥后，就發(fā)現(xiàn)死去的細(xì)胞都會(huì)被一種類似黑色液滴的東西附著，原以為是加進(jìn)去的藥物分子， 但是現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，我重新復(fù)蘇的細(xì)胞沒(méi)有加藥，也是如此， 實(shí)驗(yàn)已經(jīng)耽誤一個(gè)星期了，細(xì)胞還是不見(jiàn)好轉(zhuǎn)，郁悶死 今天拍了圖片，請(qǐng)各位大哥大姐大神幫忙分析下，出點(diǎn)主意 圖像1.jpg 圖像2.jpg 圖像3.jpg 圖像4.jpg |
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Luse_91
新蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Devil_Jimmy: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝 2014-11-09 10:11:33
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不能天天換液，細(xì)胞本身要分泌一種生長(zhǎng)因子的，你天天換液的話，細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)得很慢。你這個(gè)樣子可能是污染了吧，至于是什么污染我就不清楚了，你可以把你的耗材都滅菌啥的，重新養(yǎng)養(yǎng)試試。還有你培養(yǎng)基還和以前一樣嗎？同一種培養(yǎng)基不同廠家也會(huì)有很大影響的，我前幾天就是這樣的，現(xiàn)在一直沒(méi)養(yǎng)細(xì)胞。同一種培養(yǎng)基不同廠家培養(yǎng)基會(huì)有很大差別的。我前幾天用的是Corning的DMEM，然后直接換成Hyclone，然后細(xì)胞直接不長(zhǎng)了，但是我以前試過(guò)直接換成Gibco的，長(zhǎng)得也挺好的。 還有就是培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分了，比如糖、丙酮酸鈉，谷氨酰胺之類的，都是要注意的。 |
3樓2014-11-08 15:16:32
星火之源
木蟲(chóng) (小有名氣)
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2樓2014-11-08 13:34:05
Devil_Jimmy
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4樓2014-11-09 10:10:01
Devil_Jimmy
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5樓2014-11-09 10:11:15
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