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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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南海所老龔

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[求助] 為什么TA克隆，測(cè)序有些不是目的片段，而是大腸桿菌的序列？已有1人參與

各位蟲(chóng)友好！
RT，為什么會(huì)是大腸桿菌的序列（比對(duì)上100%）？難道是載體和大腸桿菌的序列連接上了，所以菌落在氨芐培養(yǎng)基上活了下來(lái)？歡迎有經(jīng)驗(yàn)的蟲(chóng)友談?wù)劷?jīng)驗(yàn)。

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1樓 2014-11-12 11:40:00

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王冠傑

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還有一種可能：你擴(kuò)增的片段就不對(duì)。所以你可以用擴(kuò)增的片段測(cè)個(gè)序試試。

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4樓2014-11-27 08:58:23

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wangxl722008

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我前段時(shí)間也是，一直沒(méi)找到原因，只能從頭做。

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2樓2014-11-12 11:44:59

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王冠傑

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★ ★
南海所老龔(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-11-27 20:03:05

親：TA克隆的載體一般是PMD19-T（PUC19改造的）或者PGM－Teasy，不知道你用來(lái)測(cè)序的樣本是公司提供的質(zhì)粒還是菌液，如果是質(zhì)粒測(cè)序的話是不應(yīng)該出現(xiàn)大腸桿菌序列的，如果是菌液，后期培養(yǎng)過(guò)程中可能是被污染了。還有不知道你說(shuō)的大腸桿菌序列是在哪兒比對(duì)的，能把序列發(fā)一下嘛？

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3樓2014-11-27 08:54:38

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飛約瘋?cè)嗽?/a>

新蟲(chóng)

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不知道這個(gè)實(shí)驗(yàn)是否需要x-gal啊

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人生貴在行動(dòng)，遲疑不決時(shí)，不妨先邁出小小一步。

5樓2014-11-27 09:11:21

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普通表情龍兔虎貓

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