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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 干擾/敲除 » 插入失活篩選
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插入失活篩選 已有1人參與
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| 本人最近在做乳酸菌的基因敲除實驗，基礎知識比較薄弱，用的方案是插入失活，在目的基因的中間插入四環(huán)素抗性基因，電轉(zhuǎn)后平板上會長幾個單菌落，接到液體里會長（含四環(huán)素抗性）然后PCR驗證四環(huán)素基因都有，但是P目的基因+四環(huán)素卻沒有，求助大神指點一二，是否是我篩選方法有問題？還是另有其他的篩選方法？還有就是能P出四環(huán)素基因，是否證明該質(zhì)粒已經(jīng)整合到染色體的目的基因處？ |
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2樓2015-03-27 10:13:44
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