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yjt123新蟲 (初入文壇)
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[求助]
對(duì)全血樣品的預(yù)處理問題 已有4人參與
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各位蟲子們： 請(qǐng)教你們有關(guān)做藥動(dòng)學(xué)的幾個(gè)問題。 對(duì)于新鮮取出的大鼠全血樣品，需要離心取血漿，然后加入沉淀劑沉淀蛋白，再離心，取上清液，再加入萃取劑萃取成分，再離心，取上清液進(jìn)液相。我看大多數(shù)文獻(xiàn)都是這樣操作的。那么，沉淀劑用量應(yīng)該怎么把握呢？離心的轉(zhuǎn)數(shù)和時(shí)間又有怎樣把控呢？如何判別離心的已經(jīng)完全，有什么標(biāo)準(zhǔn)和經(jīng)驗(yàn)么？ 謝謝！ |
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renzhichu525
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5樓2014-11-21 14:10:39
【答案】應(yīng)助回帖
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| 你可以使用肝素氯化鈉溶液，我當(dāng)時(shí)用的是一支注射液加100ml鹽水。采血前使用肝素溶液潤洗一下離心管，等離心管干燥后再把血放到里邊。置于轉(zhuǎn)速，如果你要紅細(xì)胞2000-3000rpm就可以，如果不要紅細(xì)胞，建議5000-10000rpm離心，因?yàn)殡x心太慢，可能會(huì)溶血，影響分析。10000rpm三到五分鐘就夠了。 |
6樓2014-11-22 17:51:37
lingshu
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7樓2014-11-22 23:26:10
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