 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 4687 | 回復(fù): 14 | ||
小T在努力！木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
急求農(nóng)桿菌Gv3101 感受態(tài)制備方法。 已有4人參與
|
|
| 如題，步驟最好詳細點，第一次做完全沒經(jīng)驗。如果覺得金幣不夠再加好嗎？急求！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有275人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 農(nóng)桿菌培養(yǎng)及制備感受態(tài)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 請問哪個公司有賣農(nóng)桿菌GV3101感受態(tài)呢？正規(guī)的，好一點的公司？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 請問有人將氨芐抗性的表達載體轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌嗎？用的是哪種農(nóng)桿菌呀？
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 天根公司感受態(tài) 可以拿來做菌種 自己制作感受態(tài)嗎？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 植物表達載體及農(nóng)桿菌菌株
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 細菌抗生素抗性誘導(dǎo)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 請問搖菌后的菌液怎么保存，謝謝
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 感受態(tài)制備及轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 農(nóng)桿菌GV3101搖菌的時候加什么抗生素啊
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】農(nóng)桿菌GV3101
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】請教高手：做農(nóng)桿菌感受態(tài)OD值搖到0.985，能用嗎？
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【分享】農(nóng)桿菌感受態(tài)制備和轉(zhuǎn)化方法
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】求農(nóng)桿菌培養(yǎng)基配方
已經(jīng)有4人回復(fù)
Neo2000
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 639 (博士)
- 金幣: 8720.2
- 紅花: 37
- 帖子: 1700
- 在線: 269.3小時
- 蟲號: 322365
- 注冊: 2007-03-11
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
2樓2014-11-22 12:08:22
chiden
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 4354.8
- 散金: 3
- 紅花: 19
- 帖子: 549
- 在線: 141.4小時
- 蟲號: 959663
- 注冊: 2010-03-03
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
14樓2014-11-25 19:01:12
小T在努力！
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1205.1
- 散金: 134
- 紅花: 1
- 帖子: 204
- 在線: 73.1小時
- 蟲號: 3155760
- 注冊: 2014-04-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2014-11-22 12:53:32
小T在努力！
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1205.1
- 散金: 134
- 紅花: 1
- 帖子: 204
- 在線: 73.1小時
- 蟲號: 3155760
- 注冊: 2014-04-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
4樓2014-11-22 21:05:36
5樓2014-11-22 21:30:46
conanyangqun
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 354.8
- 帖子: 21
- 在線: 8.4小時
- 蟲號: 1791942
- 注冊: 2012-05-03
- 專業(yè): 發(fā)育生物學(xué)
6樓2014-11-23 00:30:19
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小T在努力！(myprayer代發(fā)): 金幣+3, 贈人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-23 12:36:14
小T在努力！: 金幣+10, ★★★很有幫助 2014-11-23 15:41:53
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小T在努力！(myprayer代發(fā)): 金幣+3, 贈人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-23 12:36:14
小T在努力！: 金幣+10, ★★★很有幫助 2014-11-23 15:41:53
|
實驗試劑 利福平，LB培養(yǎng)基，NaCl，CaCl2，YEP培養(yǎng)基，卡那霉素 實驗設(shè)備 搖床，高速離心機，低溫冰箱，水浴鍋 實驗材料 根癌農(nóng)桿菌GV3101單菌落 實驗步驟 1. 根癌農(nóng)桿菌GV3101感受態(tài)細胞的制備 1) 挑取單菌落GV3101，接種于5mL附加有50mg/L的利福平的液體LB培養(yǎng)基中，28℃，200rpm，過夜； 2) 取2mL培養(yǎng)物至50mL液體LB培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)至OD600為0.5左右； 3) 將培養(yǎng)物冰浴30min，4℃，5000rpm，離心5min，棄上清； 4) 用l0mL 0.lmol/L冷的NaCl懸浮菌體； 5) 4℃，5000rpm，離心5min，棄上清； 6) 1 mL 20mmo1/L冷的CaCl2懸浮，分裝成50uL/管，液氮速凍后，-80℃保存。 2. 凍融法轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌 1) 冰浴融化農(nóng)桿菌LBA4404/GV3101感受態(tài)細胞； 2) 加入3ul表達載體質(zhì)粒，冰浴30min，液氮中凍1 min，然后在37℃水浴5min； 3) 加入950uL無抗生素的YEP培養(yǎng)基，28℃，200rpm，振蕩培養(yǎng)4h； 4) 1 0000rpm離心1 min以濃縮菌液，用100uL YEP回溶菌體； 5) 將回溶后的菌體涂于附加50mg/L卡那霉素和100mg/L利福平的固體YEP培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)36-48h。菌液PCR檢測陽性克隆 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
7樓2014-11-23 07:27:59
小T在努力！
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1205.1
- 散金: 134
- 紅花: 1
- 帖子: 204
- 在線: 73.1小時
- 蟲號: 3155760
- 注冊: 2014-04-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
8樓2014-11-23 13:11:20
小T在努力！
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1205.1
- 散金: 134
- 紅花: 1
- 帖子: 204
- 在線: 73.1小時
- 蟲號: 3155760
- 注冊: 2014-04-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
9樓2014-11-23 15:40:45
chiden
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 4354.8
- 散金: 3
- 紅花: 19
- 帖子: 549
- 在線: 141.4小時
- 蟲號: 959663
- 注冊: 2010-03-03
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
10樓2014-11-23 22:28:41
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 小T在努力！ 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 梁梁校校 2026-03-17 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +21 | rare12345 2026-03-18 | 21/1050 |
|
|
[考研] 材料學(xué)碩297已過四六級求調(diào)劑推薦 +6 | adaie 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 320求調(diào)劑0856
+3
|
不想起名字112 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +9 | 冷笙123 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程專碩求調(diào)劑 +10 | 慕寒mio 2026-03-16 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +3 | llllkkkhh 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿:南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑 +10 | Liwangman 2026-03-15 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +4 | 冬十三 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料305分求調(diào)劑 +5 | 想上岸的鯉魚 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 收復(fù)試調(diào)劑生 +4 | 雨后秋荷 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)071000 329分求調(diào)劑 +3 | 我愛生物生物愛?/a> 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | Zz版 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑 +3 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +4 | 奇點0314 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 7712b 2026-03-13 | 7/350 |
|