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shuangzi8761銀蟲 (著名寫手)
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[求助]
關(guān)于糖類分析-薄層層析TLC和HPAEC-PAD的一些問題
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各位蟲友，實(shí)驗(yàn)中遇到一個(gè)奇怪的現(xiàn)象：我是做糖類水解酶的，同一樣品用TLC和HPAEC-PAD分別檢測(cè)纖維素水解酶水解多糖CMC的產(chǎn)物，可是TLC跑的結(jié)果糖類成分和標(biāo)準(zhǔn)糖在硅膠板對(duì)應(yīng)不起來（圖1），而HPAEC-PAD的結(jié)果就能很好的把水解產(chǎn)物和標(biāo)準(zhǔn)糖對(duì)應(yīng)起來（圖2）。 我分析的原因是硅膠板可能沒充分跑開或糖上有羧甲基致使展層慢，從而產(chǎn)物尤其是約小的糖和標(biāo)準(zhǔn)糖對(duì)不起來，HPAEC-PAD的結(jié)果沒有問題；我導(dǎo)師則認(rèn)為是CMC糖上帶有羧甲基，糖類產(chǎn)物分子量相應(yīng)的會(huì)增大，故硅膠板對(duì)應(yīng)不起來是對(duì)的，HPAEC-PAD的結(jié)果有誤，不應(yīng)該標(biāo)糖和產(chǎn)物能完全對(duì)應(yīng)。但是我是同一份樣品做的倆實(shí)驗(yàn)，而且HPAEC的靈敏度要比tlc高，求助各位蟲友，該如何解釋。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 圖1.png 圖2.png |
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