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五維度的愛金蟲 (小有名氣)
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[交流]
感受態(tài)制備遇到的問題
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| 在制備感受態(tài)時(shí)，挑取無抗平板上的單菌落放置到含有無抗、氨芐、卡納和狀觀霉素（實(shí)驗(yàn)室要用）的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，驗(yàn)證原始菌液沒有被污染的情況下，接菌液至200mL培養(yǎng)基中，18攝氏度過夜搖至其OD值為0.55---0.6之間，按照分子克隆實(shí)驗(yàn)操作指南上的超級(jí)感受態(tài)制備方法進(jìn)行制備。制備的感受態(tài)之后又重新涂到含有氨芐、卡納和狀觀霉素的固體培養(yǎng)基平板上，卻長(zhǎng)出了單克隆。而且奇怪的是同時(shí)制作了幾瓶感受態(tài)，用的材料都是一樣，結(jié)果有兩瓶出了問題，感受態(tài)涂抗生素平板時(shí)長(zhǎng)出了克隆，而另外的四瓶沒有出現(xiàn)此問題。 |
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5樓2014-12-02 14:12:12
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五維度的愛(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-12-02 18:43:41
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五維度的愛(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-12-02 18:43:41
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6樓2014-12-02 16:27:19
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2014-12-05 13:05:17
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2014-12-05 13:05:17
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我最近也在做感受態(tài)，其實(shí)長(zhǎng)出來挺正常的，我覺得可能有兩方面的原因，第一就是樓上所說操作過程染菌，第二就是無抗平板上長(zhǎng)的單菌落有的正常有的有抗性，而你剛好將無抗性的挑到含抗生素的培養(yǎng)基中，卻將有問題的雜菌用來制備感受態(tài)，所以才會(huì)導(dǎo)致制備的感受態(tài)有抗性，所以無菌操作和每一步驗(yàn)證菌體的抗性非常非常重要 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
7樓2014-12-05 00:49:17
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