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夢(mèng)想飛揚(yáng)1金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
嗨嗨噠噠
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[求助]
從土壤-藻結(jié)皮中分離藻 已有1人參與
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要測(cè)定和土壤粘連在一塊的藻的植物效率PEA，可很難分離出藻，藻的密度比水稍大一點(diǎn)，用差速離心藻也沉在下面了。這里說(shuō)的藻類似于地衣，苔蘚。求大神們給點(diǎn)建議。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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zff922
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2樓2014-12-05 14:50:53
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3樓2014-12-06 01:06:45
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【答案】應(yīng)助回帖
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如果是測(cè)色素和蛋白質(zhì)，我認(rèn)為即使藻和土壤不完全分離也應(yīng)該可以的呀。測(cè)色素用甲醇萃取出來(lái)離心測(cè)上清OD就行了，蛋白直接用試劑盒土壤應(yīng)該不會(huì)有太大干擾的。 另外，藻細(xì)胞不會(huì)像你說(shuō)的那么脆弱，攪拌一下就破了，我們離心上萬(wàn)G都不會(huì)破，地衣破了也只是組織破成了單個(gè)細(xì)胞。單個(gè)細(xì)胞必須要用液氮反復(fù)凍融，或者超聲波破碎或者玻璃微珠高速打碎才能達(dá)到所要的效果。攪拌應(yīng)該不會(huì)破，你不放心的話，可以攪拌一些，然后5000g離心，看看上清變綠了沒(méi)？綠了就證明有破碎，還是無(wú)色透明證明沒(méi)有破碎。 蔗糖我們都是用來(lái)做密度梯度離心用的，那是細(xì)胞破過(guò)之后，對(duì)于測(cè)色素和蛋白質(zhì)我也沒(méi)做過(guò)，不知道會(huì)不會(huì)有影響。太高濃度會(huì)引起細(xì)胞的是水，對(duì)活性肯定有影響的。你可以先用蔗糖，分離好后再換成BG11.這樣我認(rèn)為可能會(huì)影響小一些。 |
4樓2014-12-08 09:29:37
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