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夢想飛揚(yáng)1金蟲 (正式寫手)
嗨嗨噠噠
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[求助]
從土壤-藻結(jié)皮中分離藻 已有1人參與
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要測定和土壤粘連在一塊的藻的植物效率PEA,可很難分離出藻,藻的密度比水稍大一點,用差速離心藻也沉在下面了。這里說的藻類似于地衣,苔蘚。求大神們給點建議。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |

金蟲 (正式寫手)

金蟲 (正式寫手)
嗨嗨噠噠

金蟲 (正式寫手)
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如果是測色素和蛋白質(zhì),我認(rèn)為即使藻和土壤不完全分離也應(yīng)該可以的呀。測色素用甲醇萃取出來離心測上清OD就行了,蛋白直接用試劑盒土壤應(yīng)該不會有太大干擾的。 另外,藻細(xì)胞不會像你說的那么脆弱,攪拌一下就破了,我們離心上萬G都不會破,地衣破了也只是組織破成了單個細(xì)胞。單個細(xì)胞必須要用液氮反復(fù)凍融,或者超聲波破碎或者玻璃微珠高速打碎才能達(dá)到所要的效果。攪拌應(yīng)該不會破,你不放心的話,可以攪拌一些,然后5000g離心,看看上清變綠了沒?綠了就證明有破碎,還是無色透明證明沒有破碎。 蔗糖我們都是用來做密度梯度離心用的,那是細(xì)胞破過之后,對于測色素和蛋白質(zhì)我也沒做過,不知道會不會有影響。太高濃度會引起細(xì)胞的是水,對活性肯定有影響的。你可以先用蔗糖,分離好后再換成BG11.這樣我認(rèn)為可能會影響小一些。 |

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