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huyan0817木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
具有高活性的抗原和酶制備一般流程(體外診斷用) 已有2人參與
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| 最近在公司做幾個(gè)項(xiàng)目關(guān)于抗原和酶,表達(dá)出來(lái)的蛋白活性很差(跟目前商業(yè)化的同類(lèi)型蛋白相比),我們用的序列均是專(zhuān)利上提供的。請(qǐng)問(wèn)下大神如何提高目的蛋白質(zhì)的活性?謝謝。! |
專(zhuān)家顧問(wèn) (正式寫(xiě)手)
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專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +21 |

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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我是pET28表達(dá)系統(tǒng),低溫過(guò)夜誘導(dǎo),超聲破碎,然后親和純化,透析過(guò)夜,測(cè)濃度,電泳確定,最后用試劑盒測(cè)酶活。測(cè)出來(lái)的酶活很低只有別人的30%,有一個(gè)酶甚至一點(diǎn)酶活也沒(méi)有。抗原的也是這個(gè)過(guò)程?偟膩(lái)說(shuō)我們自己弄的東西就是比市場(chǎng)上的差很多,目前就是沒(méi)有一個(gè)具體的方法來(lái)做,都是大家自己亂搞,沒(méi)有具體的一個(gè)可行性方案,這個(gè)是最大的問(wèn)題;很多時(shí)候做了大量的工作就是沒(méi)有成果。 |
專(zhuān)家顧問(wèn) (正式寫(xiě)手)
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專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +21 |

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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