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yanshumo

新蟲 (初入文壇)

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[求助] 如何去除RNA中的鹽離子？已有3人參與

提完RNA后，測(cè)紫外，260/280正常，但是225nm左右有一個(gè)很大的峰，問(wèn)了師兄說(shuō)可能是鹽離子，我中間有一步加了5M的NACL。
請(qǐng)問(wèn)各位大神們，怎樣消除鹽離子對(duì)RNA 的影響呢？

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1樓 2014-12-16 09:59:53

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Neo2000

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引用回帖:

3樓: Originally posted by yanshumo at 2014-12-16 13:00:16
我已經(jīng)洗了兩次了，洗多會(huì)不會(huì)降解掉呢...

你用滅過(guò)的depc水配，不會(huì)有問(wèn)題的

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4樓2014-12-16 15:02:56

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Neo2000

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乙醇沉淀后用75%乙醇洗下沉淀

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2樓2014-12-16 11:51:48

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yanshumo

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引用回帖:

2樓: Originally posted by Neo2000 at 2014-12-16 11:51:48
乙醇沉淀后用75%乙醇洗下沉淀

我已經(jīng)洗了兩次了，洗多會(huì)不會(huì)降解掉呢

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3樓2014-12-16 13:00:16

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liyuecoool

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1.一般純度不夠可以用氯仿抽提一次，然后乙醇沉淀再溶解。
2.操作中為什么要加入5M NaCl？可以考慮換方法提取。比如試劑盒。如果要是為了沉淀核酸完全加入的鹽，建議加緩沖液性質(zhì)的醋酸鈉，3M，PH5,.2即可。

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5樓2014-12-16 16:32:59

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