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Kobe君臨天下鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[求助]
關(guān)于two-step PCR 已有3人參與
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In this study, we used a two-step PCR protocol as previously described (19). With this approach, tags and adapters were added in a second round of PCR amplification. This method facilitates DNA amplification from complex biological samples (20), increases reproducibility, and recovers higher genetic diversity, avoiding the amplification bias that is introduced by using long fusion primers in one-step PCR amplification。 我是小白一個(gè)，這里面的tag 和adapter分別是什么意思��？還有，最主要的:這個(gè)two-step PCR 是一個(gè)什么方法，能不能就具體講一下，因?yàn)橐蚶蠋焻R報(bào)這篇文章，但是對(duì)這個(gè)完全不了解啊，去哪里找找這方面的資料？ |
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bbqlhb
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在本研究中，我們使用前面提到的兩步PCR方法。這種方法，標(biāo)簽和適配器會(huì)添加在第二輪PCR擴(kuò)增時(shí)。該方法促進(jìn)復(fù)制的生物樣本中的DNA擴(kuò)增，增加再現(xiàn)性和恢復(fù)較高的遺傳多態(tài)性，避免了此前介紹的用長(zhǎng)融合引物的一步PCR擴(kuò)增產(chǎn)生的擴(kuò)增偏移。 tag：就是標(biāo)簽的意思，用來(lái)分辨你最后PCR的產(chǎn)物。 adapter：適配器，就是接頭一樣的東西。 |
2樓2014-12-18 11:50:39
bbqlhb
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3樓2014-12-18 11:54:01
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5樓2014-12-18 14:27:35
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6樓2014-12-18 14:49:55
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7樓2014-12-18 15:24:21
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Kobe君臨天下: 金幣+3, ★★★很有幫助 2014-12-18 16:29:23
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-12-19 23:37:40
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那我就簡(jiǎn)單講一下我知道的，通常我們說(shuō)兩步pcr和三步pcr，是根據(jù) PCR的變性、退火、延伸來(lái)分。而兩步PCR就是只有變性和退火延伸兩個(gè)步驟。 而你這文章所指的應(yīng)該是RT-PCR，雖然你截取的部分沒(méi)出現(xiàn)這詞，但是看了一下就是指這個(gè)。 其中一步RT-PCR就是反轉(zhuǎn)錄和pcr擴(kuò)增在同一管中同時(shí)進(jìn)行，樣本量足的時(shí)候可以這樣做。 兩步RT-PCR就是分開，先逆轉(zhuǎn)錄，然后再加引物和其他東西進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，這樣可以減少不必要的擴(kuò)增產(chǎn)物（就是擴(kuò)增偏移）。 |
8樓2014-12-18 15:44:59
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9樓2014-12-18 16:01:51
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10樓2014-12-18 16:31:28
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