 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1614 | 回復(fù): 2 | ||
childchou銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
啟動(dòng)子克隆結(jié)果總有突變 已有2人參與
|
|
請(qǐng)教下各位高人，我克隆一個(gè)啟動(dòng)子2000bp，開始用普通Taq酶擴(kuò)增大面積突變，之后就試過好幾種高保真酶擴(kuò)增，但是都有2-3個(gè)堿基突變，有一個(gè)是與NCBI上我的目的序列相比，突變了一個(gè)然后分別多一個(gè)和少一個(gè)堿基，所以大小是一樣的，師兄說可以去PLANTCARE 分析，結(jié)果NCBI上序列和我擴(kuò)出來的序列分析出的各種作用元件什么的都是一模一樣的，沒有多也沒有少，那我能直接用我擴(kuò)出來的這個(gè)序列嗎？會(huì)對(duì)后面實(shí)驗(yàn)有影響嗎？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有210人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 含sacB基因的大腸桿菌在不含Nacl 含15%蔗糖的LB上生長(zhǎng)，不知道是什么原因？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- TAIL-PCR克隆基因的啟動(dòng)子
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 如何設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增片段？做克隆的
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 知道一個(gè)基因在花中表達(dá)量高有什么用？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 定點(diǎn)突變引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 問問pet-28a克隆構(gòu)建引物的問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 擬南芥突變體問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 如何克隆一個(gè)在小鼠、大鼠中序列已知，但在人未知的基因？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 如何讓質(zhì)粒表達(dá)--啟動(dòng)子？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 我想知道，pQE30中的T5啟動(dòng)子
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】表達(dá)載體pCAMBIA1304表達(dá)順序看不懂
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 克隆基因連接到載體上測(cè)序發(fā)現(xiàn)有一個(gè)點(diǎn)突變?cè)趺崔k？
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】基因敲除試驗(yàn)
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 生物信息學(xué)專題－生物版，醫(yī)學(xué)版和信息科學(xué)版共同創(chuàng)建
已經(jīng)有87人回復(fù)
2樓2014-12-18 21:37:25
gangouyang
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 11 (小學(xué)生)
- 金幣: 1118.2
- 紅花: 2
- 帖子: 108
- 在線: 24.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 3562332
- 注冊(cè): 2014-11-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-18 22:42:42
childchou: 金幣+10, ★★★★★最佳答案 2014-12-19 09:32:18
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-18 22:42:42
childchou: 金幣+10, ★★★★★最佳答案 2014-12-19 09:32:18
| 解決方案：請(qǐng)把用高保真酶P出來的目的片段，連成質(zhì)粒，送3個(gè)樣品測(cè)序（如果經(jīng)濟(jì)條件允許，可多測(cè)幾個(gè)），比較這3個(gè)樣品的序列，如果序列差別不大，個(gè)別堿基的差異，請(qǐng)保留出現(xiàn)比例高的質(zhì)粒用于你的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。下面解釋一下原因，因?yàn)槟闾崛〉幕蚪M是個(gè)mix，本身就很復(fù)雜，但你測(cè)序又是單clone，所以會(huì)出現(xiàn)一些不一致的地方，所以就需要你通過幾個(gè)clone測(cè)序來確定你實(shí)驗(yàn)對(duì)象的序列。另外，如果你非要迷信NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)里面的序列，可用定點(diǎn)突變的方法把你認(rèn)為不對(duì)的地方全部都變成跟NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)里面的序列一致，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。順便說一句，NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)里面的信息是需要更新的，有時(shí)候N久都沒更新，所以需要通過廣大苦逼的生物科研工作人員的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)去更新它。我的建議希望對(duì)樓主有所幫助。 |
3樓2014-12-18 22:03:09
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 childchou 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿北京科技大學(xué)085601材料工程英一數(shù)二初試總分335求調(diào)劑 +6 | 雙馬尾痞老板2 2026-04-01 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +3 | 梁梁校校 2026-04-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856，269分求調(diào)劑 +8 | 有學(xué)上就行求求?/a> 2026-03-30 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +4 | 汪�。�！ 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +16 | PolarBear11 2026-03-26 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 材料專碩調(diào)劑 +17 | 椰椰。 2026-03-29 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 310分求調(diào)劑 +4 | 成功上岸wang 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿085600中科院寧波所276分求調(diào)劑 +22 | 材料學(xué)257求調(diào)劑 2026-03-28 | 23/1150 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +8 | Lyy930824@ 2026-03-29 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 349求調(diào)劑 +6 | 吃的不少 2026-04-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥298調(diào)劑求助 +4 | 元元青青 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +6 | 呼吸都是減肥 2026-04-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 【調(diào)劑】一志愿廈大生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +3 | Echo蝦米 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 309分085801求調(diào)劑 +7 | 學(xué)員Gtwj7W 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 抱歉 +3 | 田洪有 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[有機(jī)交流] 考研調(diào)劑 +8 | watb 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿南開大學(xué)0710生物學(xué)359求調(diào)劑 +5 | 兔兔兔111223314 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | @MZB382400 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 藥學(xué)105500求調(diào)劑 +3 | Ssun。。 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑一志愿哈工大324 +7 | 閆旭東 2026-03-28 | 9/450 |
|