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病毒濃度
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請問大俠,兩個病毒分別是雙分體病毒屬和維多利亞病毒屬,都是球狀病毒, 1病毒提取后,測定出A260/A280為1.33和1.24,請問如何得知病毒的濃度呢? 2是儀器上顯示的2.65mg/ml和6.05mg/ml么,還是儀器上顯示的是蛋白濃度呢? 3多少濃度可以用來拍電鏡? 4是否要用別的實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證它們是目的病毒,用反轉(zhuǎn)錄么? 5拍完電鏡,還能用來做侵染么? 6提完保存在哪里比較好呢?4度還是-80?用加其他試劑么? 回答任意一條都會答謝的,求幫助~~~ |

銀蟲 (正式寫手)

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RNA病毒的話,簡單一點(diǎn)可以做個RT,要是目的病毒量比較少就來了qRT,接著跑膠看看,有相似的大小條帶,想精確點(diǎn)測個序也行,我記得NARKER相應(yīng)條帶也有代表相應(yīng)的目的條帶濃度大小吧,還得看具體的marker。也可以直接跑個RNA膠,不過需要特別注意不要污染了。之前做手足口病還有呼吸道病毒的時候是在這么干的,不知道適不適合你的實(shí)驗(yàn)。至于A260/A280的比值,不可全信,有時候RNA降解了單靠這個比值也不能完全反映。過夜或者長期的話最好-80,暫時保存4度就好,但時間不要太長以免降解,至于加什么,我是沒加,不知道你的那些病毒需不需要加,最好查查哈。電鏡的話,沒做過,不好意思這個就不太清楚了。希望大家能交流交流哦 |

金蟲 (小有名氣)
鐵蟲 (初入文壇)
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其實(shí)可以從病毒中提取核酸來跑電泳圖嘗試一下吧?我跑蛋白電泳肉眼可見一條帶的時候就送去拍電鏡了,但是一個視野內(nèi)只有兩三個粒子。4不懂5,你可以拍電鏡之前就分裝,無菌的可以做轉(zhuǎn)染。6加百分之5到10的DMSO,存于負(fù)八十度。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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