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病毒濃度
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請(qǐng)問大俠，兩個(gè)病毒分別是雙分體病毒屬和維多利亞病毒屬，都是球狀病毒， 1病毒提取后，測(cè)定出A260/A280為1.33和1.24，請(qǐng)問如何得知病毒的濃度呢？ 2是儀器上顯示的2.65mg/ml和6.05mg/ml么，還是儀器上顯示的是蛋白濃度呢？ 3多少濃度可以用來拍電鏡？ 4是否要用別的實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證它們是目的病毒，用反轉(zhuǎn)錄么？ 5拍完電鏡，還能用來做侵染么？ 6提完保存在哪里比較好呢？4度還是-80？用加其他試劑么？ 回答任意一條都會(huì)答謝的，求幫助~~~ |
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2樓2015-01-18 10:25:05
3樓2015-01-20 21:05:19
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lqf808: 金幣+2, 謝謝應(yīng)助 2015-01-26 07:12:47
lqf808: 金幣+2, 謝謝應(yīng)助 2015-01-26 07:12:47
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RNA病毒的話，簡(jiǎn)單一點(diǎn)可以做個(gè)RT，要是目的病毒量比較少就來了qRT,接著跑膠看看，有相似的大小條帶，想精確點(diǎn)測(cè)個(gè)序也行，我記得NARKER相應(yīng)條帶也有代表相應(yīng)的目的條帶濃度大小吧，還得看具體的marker。也可以直接跑個(gè)RNA膠，不過需要特別注意不要污染了。之前做手足口病還有呼吸道病毒的時(shí)候是在這么干的，不知道適不適合你的實(shí)驗(yàn)。至于A260/A280的比值，不可全信，有時(shí)候RNA降解了單靠這個(gè)比值也不能完全反映。過夜或者長(zhǎng)期的話最好-80，暫時(shí)保存4度就好，但時(shí)間不要太長(zhǎng)以免降解，至于加什么，我是沒加，不知道你的那些病毒需不需要加，最好查查哈。電鏡的話，沒做過，不好意思這個(gè)就不太清楚了。希望大家能交流交流哦 |
4樓2015-01-25 22:01:00
李想飄
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5樓2015-10-20 10:36:09
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其實(shí)可以從病毒中提取核酸來跑電泳圖嘗試一下吧？我跑蛋白電泳肉眼可見一條帶的時(shí)候就送去拍電鏡了，但是一個(gè)視野內(nèi)只有兩三個(gè)粒子。4不懂5，你可以拍電鏡之前就分裝，無菌的可以做轉(zhuǎn)染。6加百分之5到10的DMSO，存于負(fù)八十度。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2020-01-09 00:15:59
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