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求助關(guān)于番茄TY3標記（P6-25）PCR檢測所遇到的奇怪問題�。。� 已有2人參與
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我們實驗室用番茄TY3標記（P6-25）對番茄育種材料進行抗性檢測，一直出現(xiàn)問題，現(xiàn)將問題描述如下： 我們進行番茄樣品的大量檢測，剛開始的時候這對引物的效果還不錯，但之后絕大多數(shù)DNA樣品均出現(xiàn)整個泳道彌散的狀況（明天我再上圖，現(xiàn)在手頭沒有），這里提取DNA用的都是試劑盒，我們懷疑過DNA質(zhì)量的問題，就用CTAB以及天根的試劑盒，包括引物換過生工和英俊的，都沒有任何改善。 在此之后，我們帶著我們的引物、DNA去外地農(nóng)科院找原因，描述一下我做的主要實驗，也是很困惑的地方： 1 首先，我們的樣品在農(nóng)科院提的DNA分別用我們的引物和農(nóng)科院的引物進行PCR，結(jié)果我們的引物仍然出現(xiàn)泳道彌散的狀況，而他們的引物P出很清晰的條帶。 2 至此，我覺得問題找到了，就帶著農(nóng)科院的引物、混合酶、DNA回到我們實驗室，做重復，結(jié)果仍然泳道彌散。 3 我們也懷疑過我們實驗室的PCR儀、水和TAE電泳系統(tǒng)的問題，用哇哈哈純凈水進過高溫滅菌更換了水和整個TAE電泳液，結(jié)果仍然重復不出來。 4 我們帶著做PCR的所有東西到當?shù)匾凰髮W，用他們的PCR儀和電泳系統(tǒng)，依舊重復不出來，帶著一部分PCR產(chǎn)物回我們實驗室跑電泳，結(jié)果依舊。 描述不清的地方請再問我，非常感謝！ 我們似乎排除了所有的因素，已經(jīng)找不到頭緒了，還望高手不吝賜教！感激不盡！ |
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3樓2015-01-17 18:35:33
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5樓2015-01-17 19:49:14
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