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[求助] HPLC 兩種標(biāo)品出峰時(shí)間居然一樣，是怎么回事？已有11人參與

基線很平，峰型很好，用的是20%的乙腈做流動(dòng)相，等度洗脫，兩種標(biāo)品結(jié)構(gòu)式只相差一個(gè)甲基，結(jié)果無(wú)論單標(biāo)還是混標(biāo)，兩個(gè)樣品的單標(biāo)和混標(biāo)出峰時(shí)間幾乎一樣，都是只有一個(gè)峰，怎么回事��？求教各位親人~

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人生在世，有所不為，有所必為！

1樓 2015-01-26 09:14:00

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沒(méi)分開(kāi)唄，更換流動(dòng)相條件，或者改為梯度洗脫，或者換用合適的柱子。

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為天地立心，為生民立命，為往圣繼絕學(xué)，為萬(wàn)世開(kāi)太平

2樓2015-01-26 09:16:44

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Arlen0899

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兩種物質(zhì)在該流動(dòng)相中出峰時(shí)間差不多，可以換個(gè)流動(dòng)相

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3樓2015-01-26 09:18:46

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望陳莫及1984

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也許就是極性完全相同，分不開(kāi)，這個(gè)問(wèn)題在液質(zhì)聯(lián)用（HPLC-MS/MS）上就是小事一樁，不是所選的分子量根本進(jìn)不去二級(jí)質(zhì)譜。

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命中注定的自作自受

9樓2015-01-26 13:20:32

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huihui2255365

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走梯度試試，流動(dòng)相不合適同時(shí)分開(kāi)，應(yīng)該是兩個(gè)物質(zhì)結(jié)構(gòu)式太接近，換個(gè)柱子試試

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4樓2015-01-26 10:16:23

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archbishop

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保留時(shí)間一樣是正常現(xiàn)象，更何況只相差一個(gè)甲基。你可以嘗試改為梯度洗脫，如果HPLC分不開(kāi)你可以用UPLC。

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雲(yún)幕低垂映桂子，江月留白問(wèn)柳心。

5樓2015-01-26 11:43:22

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superyeast

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如果能隱約看到一個(gè)肩峰，通過(guò)調(diào)整梯度是可能分開(kāi)的。否則試試換溶劑，換緩沖鹽體系和pH。

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6樓2015-01-26 13:02:07

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引用回帖:

6樓: Originally posted by superyeast at 2015-01-25 17:02:07
如果能隱約看到一個(gè)肩峰，通過(guò)調(diào)整梯度是可能分開(kāi)的。否則試試換溶劑，換緩沖鹽體系和pH。

忘了提一句如果有條件換柱子往往效果最直接，最明顯。

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7樓2015-01-26 13:03:45

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mxy216

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相差一個(gè)甲基，極性應(yīng)該差不多的，你是用的色譜柱粒徑多少啊，可考慮換個(gè)3.5μ的試試，流動(dòng)相更改難度不小。希望有用

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8樓2015-01-26 13:06:24

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你至少要把梯度條件摸索一遍，找到最好效果，如果還是分不開(kāi)才考慮換柱子，走等度分不開(kāi)很正常

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10樓2015-01-26 13:21:45

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