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juliajuhoon木蟲 (小有名氣)
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[求助]
胰島素 HPLC 已有1人參與
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中國(guó)藥典2010版的含量測(cè)定方法如下： 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（5～10μm）；0.2mol/L硫酸鹽緩沖液（取無水硫酸鈉28.4g，加水溶解后，加磷酸2.7ml，乙醇胺調(diào)節(jié)pH值至2.3，加水至1000ml）-乙腈（74∶26）為流動(dòng)相，柱溫為40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。取系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用溶液20μl（取胰島素對(duì)照品，用0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含40單位的溶液，室溫放置至少24小時(shí)），注入液相色譜儀，記錄色譜圖，胰島素峰和A21脫酰氨胰島素峰之間的分離度應(yīng)不小于1.8，拖尾因子應(yīng)不大于1.8。 測(cè)定法 取本品適量，精密稱定，用0.01mol/L鹽酸溶液定量稀釋制成每1ml中含40單位的溶液（臨用新配，2～4℃保存，48小時(shí)內(nèi)使用）。精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取胰島素對(duì)照品適量，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以胰島素峰面積與A21脫酰氨胰島素峰（與胰島素峰的相對(duì)保留時(shí)間約為1.2）面積之和計(jì)算，即得。 想問下（1）為何加乙醇胺調(diào)節(jié)PH？ （2）0.2mol/L的硫酸鹽緩沖液濃度是不是太大了？ 我按藥典配制了流動(dòng)相，但是沒有加乙醇胺，超聲過濾后進(jìn)行走基線，誰知一開泵走基線時(shí)管路就被堵上了。所以向大家求助。望各位大俠給予解惑！ |
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