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crispr/cas9 菜鳥SOS求助 跪謝！ 已有1人參與
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最近才接觸這個新技術(shù) 想做基因敲除鼠 但是看的稀里糊涂 想問幾個最基礎(chǔ)的問題：1.設(shè)計sgRNA時要合成2條單鏈DNA Oligos，請問這兩條是分別結(jié)合我想要切割的外顯子到的兩側(cè)，然后將外顯子切割掉嗎（我之前一直理解為sgRNA是與我目標外顯子結(jié)合，然就將目標DNA切斷的，而不是切割一段序列），為什么那兩條單鏈DNA Oligo是反向互補的？那如果要用CAS9n，那不就得設(shè)計四條sgRNA? 2.外顯子長度超過250bp，但是張鋒實驗的sgRNA設(shè)計軟件要求輸入序列不超過250bp，該如何選擇？謝謝！感激不盡！ |
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2樓2015-02-05 14:18:39
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