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huangsz997銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于農(nóng)桿菌侵染過程共培養(yǎng)及篩選的細(xì)節(jié)問題 已有2人參與
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最近在做農(nóng)桿菌侵染水稻愈傷的實(shí)驗(yàn),流程很熟但具體細(xì)節(jié)卻無人可問。比如,1.在共培養(yǎng)(PH5.5)之前,用農(nóng)桿菌侵染(PH5.5)愈傷后,愈傷需要吹干在放到共培養(yǎng)基上,每次都擔(dān)心吹干時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)不會(huì)愈傷就掛了?但時(shí)間短又怕在共培養(yǎng)基上長(zhǎng)菌過多。2.我共培養(yǎng)3天(28℃,暗培)后一般都是農(nóng)桿菌會(huì)把愈傷長(zhǎng)滿,這種狀態(tài)對(duì)嗎?3.用清水和500mg/L羧芐青霉素洗到什么程度合適?有時(shí),我在篩選培養(yǎng)基(PH5.8)上發(fā)現(xiàn)愈傷油亮,感覺又有了農(nóng)桿菌,是不是不應(yīng)該在篩選培養(yǎng)基上還看到農(nóng)桿菌? 有沒有前輩在這些細(xì)節(jié)及實(shí)驗(yàn)流程上給一些參考(最好是細(xì)節(jié)解釋清楚,protocol也行。,萬分感謝。。 |
新蟲 (小有名氣)
銅蟲 (初入文壇)
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