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fds1984

銀蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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[求助] 有關(guān)適配體的問(wèn)題

Prior to immobilization of the aptamers, the biotinylated aptamer solution (14 μM aptamers, dissolved in 50 mM Tris-HCl + 20 mM KCl + 600 mM NaCl, pH 7.4) was heated at 90 °C for 3 min followed by cooling at room temperature. The heat treatment was a common practice applied to allow the aptamers to form the desired conformation through renaturation.
請(qǐng)問(wèn)：以上文獻(xiàn)將適配體90 °C加熱3分鐘后，不會(huì)失活了嗎？還能繼續(xù)用來(lái)對(duì)特定蛋白質(zhì)的萃取嗎？

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1樓 2015-02-14 23:18:44

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robinhud

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不會(huì)失活，可以用來(lái)繼續(xù)試驗(yàn)，還可以90 °C加熱5-10分鐘后，立即放到碎冰里·5-10分鐘，這樣做，可以：allow the aptamers to form the desired conformation ，只有形成了一定的二級(jí)結(jié)構(gòu)（一般是頸環(huán)結(jié)構(gòu)）即desired conformation ，aptamers才能識(shí)別它的靶分子。

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回復(fù)此樓

2樓2015-02-22 10:36:32

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