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tmty金蟲 (著名寫手)
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[求助]
ELISA測定一類物質(zhì)的含量？ 已有1人參與
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| 已經(jīng)測定所得的抗體對幾種物質(zhì)具有較高的交叉反應(yīng)率，怎樣用ELISA法去測定這幾種物質(zhì)的總含量？ |
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2樓2015-02-28 10:13:37
tmty
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3樓2015-02-28 11:39:58
【答案】應(yīng)助回帖
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假設(shè)一下，你的抗體特異性測定物質(zhì)A，但是該抗體存在對物質(zhì)B、C、D的交叉反應(yīng)，假設(shè)抗體對物質(zhì)B、C、D的交叉反應(yīng)分別是B（50%），C（30%），D（20%）。 現(xiàn)在樓主是想用這對抗體在ELISA中去測定某物質(zhì)X中，物質(zhì)A、B、C、D的總含量？ 如果已知物質(zhì)X只含有物質(zhì)A、B、C、D中的一種，那你可以測定那種物質(zhì)的總量的。 如果物質(zhì)X含有物質(zhì)A、B、C、D中兩種或兩種以上，那就不能測定物質(zhì)X中所含有的物質(zhì)A、B、C、D的總量。因為通過ELISA實驗，你可以得到物質(zhì)X的OD值，但是你不能確定是物質(zhì)A、B、C、D的哪種或哪幾種導(dǎo)致了該OD值的產(chǎn)生。舉個例子，假設(shè)因為通過ELISA實驗，你得到物質(zhì)X的OD值為1，再假設(shè)物質(zhì)A為100mg時，其OD值為1，那么物質(zhì)X（OD值=1）含有物質(zhì)A、B、C、D的量可能會有：100mg的A（總量：100mg），50mg的A+100mg的B（總量：150mg），50mgA+50mg的B+83mg的C（總量：183mg），25mg的A+60mgB+40mg的C+165mg的D（總量：290）等等，有無數(shù)種可能性，而且每一種可能性的總量都不同，所以根本就無法確定物質(zhì)X中所含有的物質(zhì)A、B、C、D的總量。 |
4樓2015-02-28 11:44:19
tmty
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5樓2015-02-28 15:42:26
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你看看，我前面假設(shè)了抗體對物質(zhì)B、C、D的交叉反應(yīng)分別是B（50%），C（30%），D（20%）。而抗體對物質(zhì)A的檢測能力則為100%。 50mg的A+100mg的B（總量：150mg）=A貢獻了50mg的OD值，B貢獻了100mg*50%=50mg的OD值，加起來就是100mg的物質(zhì)A的OD值。 同理，50mg的A+50mg的B+83mg的C（總量：183mg）就是50mg+50*50%+83*30%=100mg，對應(yīng)的就是物質(zhì)A100mg的OD值； 25mg的A+60mgB+40mg的C+165mg的D=25*100%+60+50%+40*30%+165*20%=100mg，對應(yīng)的就是物質(zhì)A100mg的OD值。 |
6樓2015-03-04 12:19:45
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