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tmty金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[求助]
ELISA測(cè)定一類(lèi)物質(zhì)的含量? 已有1人參與
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| 已經(jīng)測(cè)定所得的抗體對(duì)幾種物質(zhì)具有較高的交叉反應(yīng)率,怎樣用ELISA法去測(cè)定這幾種物質(zhì)的總含量? |

金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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假設(shè)一下,你的抗體特異性測(cè)定物質(zhì)A,但是該抗體存在對(duì)物質(zhì)B、C、D的交叉反應(yīng),假設(shè)抗體對(duì)物質(zhì)B、C、D的交叉反應(yīng)分別是B(50%),C(30%),D(20%)。 現(xiàn)在樓主是想用這對(duì)抗體在ELISA中去測(cè)定某物質(zhì)X中,物質(zhì)A、B、C、D的總含量? 如果已知物質(zhì)X只含有物質(zhì)A、B、C、D中的一種,那你可以測(cè)定那種物質(zhì)的總量的。 如果物質(zhì)X含有物質(zhì)A、B、C、D中兩種或兩種以上,那就不能測(cè)定物質(zhì)X中所含有的物質(zhì)A、B、C、D的總量。因?yàn)橥ㄟ^(guò)ELISA實(shí)驗(yàn),你可以得到物質(zhì)X的OD值,但是你不能確定是物質(zhì)A、B、C、D的哪種或哪幾種導(dǎo)致了該OD值的產(chǎn)生。舉個(gè)例子,假設(shè)因?yàn)橥ㄟ^(guò)ELISA實(shí)驗(yàn),你得到物質(zhì)X的OD值為1,再假設(shè)物質(zhì)A為100mg時(shí),其OD值為1,那么物質(zhì)X(OD值=1)含有物質(zhì)A、B、C、D的量可能會(huì)有:100mg的A(總量:100mg),50mg的A+100mg的B(總量:150mg),50mgA+50mg的B+83mg的C(總量:183mg),25mg的A+60mgB+40mg的C+165mg的D(總量:290)等等,有無(wú)數(shù)種可能性,而且每一種可能性的總量都不同,所以根本就無(wú)法確定物質(zhì)X中所含有的物質(zhì)A、B、C、D的總量。 |
金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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