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wenjia0371銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
有關(guān)HPLC中出現(xiàn)的若干小問題～求各路大神解答 已有1人參與
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最近連續(xù)購(gòu)買不同廠家色譜柱（進(jìn)口），測(cè)柱效正常。 但測(cè)試重組蛋白樣品時(shí)，目的峰開始拖尾；而且隨著進(jìn)樣針數(shù)的增加，拖尾嚴(yán)重。 之前用資生堂的柱子一直測(cè)試是沒問題的，但是這次購(gòu)買相同型號(hào)的，峰卻拖尾嚴(yán)重。 后來，又買了一根賽芬柱子，流動(dòng)相不過濾，測(cè)試重組蛋白樣品，峰形正常了。 PS:所有測(cè)試的柱壓正常；流動(dòng)相為乙腈和水，梯度洗脫，室溫測(cè)試，波長(zhǎng)為214nm，流速為1ml/min。 究其原因，不知道是什么原因。 1. 請(qǐng)問會(huì)不會(huì)是濾膜被溶解造成的色譜柱臟掉了。那請(qǐng)問假如是的話，有什么辦法將柱子清潔呢，畢竟也是新購(gòu)置的柱子？ 2. 請(qǐng)問大家所熟知的水相濾膜和有機(jī)相濾膜，是怎么區(qū)分的呢？我就此問過津騰廠家人員，說聚醚砜材質(zhì)的濾膜是水系濾膜，那么這樣的話，查閱耐受性表，這種水系濾膜是可以耐受乙腈的。而查看網(wǎng)絡(luò)上資料，一般說的水系濾膜的說法都為只能過濾水。該如何看待？ 3. 請(qǐng)問還有什么其它原因，造成了柱子被損壞的致命傷害呢？ ～～～求各路大神指路明道，謝謝謝謝 |
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| 樓主有沒有試過流動(dòng)相不變，取少許吐溫進(jìn)液相試一下看峰型是什么樣的，個(gè)人懷疑是吐溫的原因，導(dǎo)致的你說的一系列變化。另外不要拿水系濾膜過率有機(jī)溶劑，個(gè)人建議，僅供參考。 |
wenjia03717樓2015-03-02 14:38:25
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wenjia0371: 金幣+20, ★有幫助, 5 2015-02-27 16:01:06
| 如果是過濾液溶解了濾膜，那么是可以目測(cè)出來的，溶解了綠濾膜的濾液是渾濁的；水系濾膜只可以濾過水系的溶劑，有機(jī)系的濾過有機(jī)系以外一般也可以用于濾過水系的，不要光看材質(zhì)和過分依賴網(wǎng)上查詢的東西；如果你懷疑是溶劑污染導(dǎo)致色譜柱效差，注意觀察柱壓是否嚴(yán)重升高，一般有堵塞的話柱壓會(huì)升高很快，并注意觀察溶劑是否渾濁；關(guān)于色譜柱這部分你描述的不多，無法幫你判斷，不過你可以咨詢色譜柱的相關(guān)技術(shù)人員，他們更專業(yè)。 |
2樓2015-02-27 14:06:36
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3樓2015-02-27 16:09:17
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4樓2015-02-28 09:47:06
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