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xuemingwu木蟲(chóng) (小有名氣)
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至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
| 酶在溶液中三維結(jié)構(gòu)及其催化機(jī)制是當(dāng)今酶催化研究前沿科學(xué)問(wèn)題。米曲霉果糖基轉(zhuǎn)移酶溶液結(jié)構(gòu)至今尚未得到解析,因此溶液中該酶與反應(yīng)底物識(shí)別及轉(zhuǎn)糖基反應(yīng)機(jī)制并不清楚。本課題以米曲霉果糖基轉(zhuǎn)移酶AoFT催化蔗糖與葡萄糖-6-乙酸酯生成蔗糖-6-乙酸酯為模式反應(yīng),采用異核多維液相核磁共振技術(shù)解析AoFT溶液結(jié)構(gòu)及其與底物的相互作用,結(jié)合生化突變、圓二色譜、熒光色譜和差示掃描量熱方法,分析其結(jié)構(gòu)域功能,確定AoFT與底物結(jié)合的活性位點(diǎn)精細(xì)結(jié)構(gòu),揭示溶液中AoFT催化底物的識(shí)別機(jī)制;通過(guò)研究AoFT主鏈動(dòng)力學(xué)性質(zhì),深入分析其溶液構(gòu)象的動(dòng)態(tài)變化與動(dòng)力學(xué)之間關(guān)系,闡明溶液中AoFT催化作用機(jī)制;在獲得AoFT三維結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)行分子設(shè)計(jì),拓寬AoFT對(duì)底物選擇性,進(jìn)而提高酶催化效率。研究成果將揭示果糖基轉(zhuǎn)移酶溶液結(jié)構(gòu)及催化機(jī)制,在糖基轉(zhuǎn)移酶定向改造以及糖基化學(xué)品生物合成等方面具有重要理論意義和使用價(jià)值。 |

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