 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1032 | 回復(fù): 5 | |||
sunday1234新蟲 (小有名氣)
|
[交流]
求助，110bp左右長的雙鏈DNA用什么方法獲得，序列中有重復(fù)。 已有4人參與
|
| 想獲得一段長110bp左右的雙鏈DNA，序列為5‘-CTTTGGTCTCACCAAAACGTTAAATCCGAAACAGAGTCGTTTTAGAGCTATGCTGTTTTGAATGGTCCCAAAACTTAATCTTAGAACCTTCTGTGTTTTAGAGAGAGACCTTTC-3’，在公司里合成了該雙鏈DNA，但由于連在載體上，需通過酶切回收得到，由于回收困難。所以想通過PCR擴(kuò)增設(shè)計了引物正向：CTTTGGTCTCACCAAAAC反向：gaaaggtctctctctaaac，擴(kuò)增后不加模板DNA，與加模板DNA都能擴(kuò)出110bp左右的條帶。想請教大家還有什么辦法可以直接得到這個長110bp左右的雙鏈DNA。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有184人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 單鏈DNA大小為100np,PCR后跑電泳，條帶在200bp左右是怎么回事？求助�。�
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 請教一段DNA單鏈序列的結(jié)構(gòu)分析報告中幾個專業(yè)參數(shù) 如ΔG，ΔH,ΔS代表什么意思？
已經(jīng)有6人回復(fù)
liuderong
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 310 (大學(xué)生)
- 金幣: 8202.1
- 紅花: 31
- 帖子: 582
- 在線: 142.1小時
- 蟲號: 1882145
- 注冊: 2012-07-07
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2015-03-03 20:25:04
一磚頭飄死
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 295.8
- 帖子: 92
- 在線: 38.2小時
- 蟲號: 3067487
- 注冊: 2014-03-18
- 專業(yè): 生物化學(xué)
★ ★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2015-03-07 23:04:51
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2015-03-07 23:04:51
|
首先跟你說下我自己做實(shí)驗中遇到這樣的問題的做法，有可能不完整，可以借鑒。 我的方法是這樣的： ①首先設(shè)計一條完整的110bp的寡核苷酸單鏈，當(dāng)做引物合成，這個可以讓個引物合成公司完成,Primer1 ②設(shè)計一段長約20bp的，和110bp寡核苷酸 3端完全互補(bǔ)的一段引物，Primer2 ③加入Primer1 and Primer2 94度 5min ，冰上急冷（退火，讓兩條鏈結(jié)合上去） ③利用 Klenow Fragment DNA聚合酶，就有5到3端的聚合作用（補(bǔ)平粘性末端，形成完整的平末端） ④如果加入了酶切位點(diǎn)可以酶切后，用愛思進(jìn)的PCR純化試劑盒回收，記得加一個體積的異丙醇。 希望能幫到你……………… |
3樓2015-03-04 08:55:43
781055707
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 291 (大學(xué)生)
- 金幣: 3118.2
- 散金: 46
- 紅花: 19
- 帖子: 2030
- 在線: 579.3小時
- 蟲號: 3046113
- 注冊: 2014-03-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2015-03-04 10:22:25
sunday1234
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 254.6
- 帖子: 68
- 在線: 38.9小時
- 蟲號: 1853191
- 注冊: 2012-06-09
- 專業(yè): 抗感染藥物藥理
5樓2015-03-19 14:47:31
Neo2000
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 639 (博士)
- 金幣: 8720.2
- 紅花: 37
- 帖子: 1700
- 在線: 269.3小時
- 蟲號: 322365
- 注冊: 2007-03-11
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
6樓2015-03-19 17:28:12
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 sunday1234 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +7 | Trying] 2026-03-31 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑：085600材料與化工，考材科基，總分319 +15 | 678lucky 2026-03-31 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +9 | 山頂見α 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械學(xué)碩總分317求調(diào)劑！�。。� +5 | Acaciad 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 土木304求調(diào)劑 +4 | 兔突突突， 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 總分322求生物學(xué)/生化與分子/生物信息學(xué)相關(guān)調(diào)劑 +6 | 星沉uu 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿西交288化工專碩求調(diào)劑 +4 | 好運(yùn)好運(yùn)接接 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 各位老師好，我的一志愿為北京科技大學(xué)085601材料專碩 +10 | Koxui 2026-03-28 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑323材料與化工 +10 | 1124361 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +8 | 星野? 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 337求調(diào)劑 +6 | 《樹》 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 種圣賜 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +7 | A child 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +5 | 哇盧卡庫 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 崔wj 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 085602化學(xué)工程求調(diào)劑。
+4
|
平樂樂樂 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085601求調(diào)劑總分293英一數(shù)二 +4 | 鋼鐵大炮 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京郵電大學(xué) 288分 材料考研 求調(diào)劑 +3 | jl0720 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0854人工智能方向招收調(diào)劑 +4 | 章小魚567 2026-03-24 | 4/200 |
|