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Super少新蟲 (初入文壇)
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[求助]
多糖分離純化~~求高手進(jìn)~~ 已有2人參與
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| 多糖的分離純化，老師讓用HPLC，實(shí)驗(yàn)室有Superdex柱子，實(shí)驗(yàn)前需要做什么工作啊？問了問師姐，又是緩沖液，又是洗脫液，又是調(diào)pH的，全都亂了。老師只說(shuō)了用HPLC，超純水洗脫，進(jìn)行粗分。其他的啥都沒說(shuō)，現(xiàn)在不知道流程啊，機(jī)器也沒用過。請(qǐng)熟悉實(shí)驗(yàn)步驟的，講一下開始前需要準(zhǔn)備什么啊，越具體越好~！時(shí)間緊迫，不勝感激啊~~~��！ |
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喜氣_羊羊
鐵蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 這是我提取枸杞多糖的前處理，枸杞50 g剪碎，置于V（三氯甲烷）：V（甲醇）=2 ：1溶液200 ml、60℃回流脫脂3次，每次2 h，濾除溶劑，殘?jiān)鼡]干溶劑后加入75%乙醇（V/V）200 ml，超聲提取2次，每次30min，過濾，待殘?jiān)鼡]干乙醇后加入蒸餾水，超聲提取2次，每次30min，過濾，濃縮。加無(wú)水乙醇至醇濃度80%，4℃沉淀12h，過濾，并依次再依次用無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，揮干溶劑，溶于去離子水50 ml，并采用Sevag試劑[正丁醇：三氯甲烷=1:4（V/V）]除去蛋白至無(wú)沉淀，得到粗多糖。 |
2樓2015-03-11 15:52:47
wellasm
金蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
3樓2015-03-11 19:00:44
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