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Super少新蟲 (初入文壇)
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[求助]
多糖分離純化~~求高手進(jìn)~~ 已有2人參與
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| 多糖的分離純化,老師讓用HPLC,實(shí)驗(yàn)室有Superdex柱子,實(shí)驗(yàn)前需要做什么工作?問了問師姐,又是緩沖液,又是洗脫液,又是調(diào)pH的,全都亂了。老師只說了用HPLC,超純水洗脫,進(jìn)行粗分。其他的啥都沒說,現(xiàn)在不知道流程啊,機(jī)器也沒用過。請熟悉實(shí)驗(yàn)步驟的,講一下開始前需要準(zhǔn)備什么啊,越具體越好~!時(shí)間緊迫,不勝感激啊~~~!! |
鐵蟲 (初入文壇)
| 這是我提取枸杞多糖的前處理,枸杞50 g剪碎,置于V(三氯甲烷):V(甲醇)=2 :1溶液200 ml、60℃回流脫脂3次,每次2 h,濾除溶劑,殘?jiān)鼡]干溶劑后加入75%乙醇(V/V)200 ml,超聲提取2次,每次30min,過濾,待殘?jiān)鼡]干乙醇后加入蒸餾水,超聲提取2次,每次30min,過濾,濃縮。加無水乙醇至醇濃度80%,4℃沉淀12h,過濾,并依次再依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌,揮干溶劑,溶于去離子水50 ml,并采用Sevag試劑[正丁醇:三氯甲烷=1:4(V/V)]除去蛋白至無沉淀,得到粗多糖。 |
金蟲 (初入文壇)
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