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lulonghai金蟲 (小有名氣)
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[求助]
基線問題 已有3人參與
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最近做3.1類原料藥，儀器為Waters ACQUITY UPLC , 色譜柱為常規(guī)的色譜柱，采用的流動相為0.05%TFA水和0.05%TFA乙腈，在220nm波長下0.05%TFA乙腈：0.05%TFA水（90:10）時，基線非常難看，波動很大, 像進了氣泡樣。而在260nm下看此段基線非常平穩(wěn)，因此可以排除進了氣泡問題，我嘗試按相同梯度用乙腈：水走，基線非常平穩(wěn)。所以我懷疑是TFA引起的，如此如何解決呢？我的流動相條件如下：圖譜見附件。 時間（min) 0.05%TFA乙腈 0.05%TFA水 0 10% 90% 10 40% 60% 25 90% 10% 50 90% 10% |
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在220nm波長下,三氟乙酸是有吸收的。走梯度肯定會出現(xiàn)嚴(yán)重的基線波動。如果你不是走液質(zhì)，建議你換成磷酸鹽吧，它在低波長沒有吸收。效果可能好很多，或者直接先用磷酸水試試，直接調(diào)你要的PH值。此外，我也感覺目前梯度還可以優(yōu)化的。樓主先這么試試，有效了記得來反饋 |
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lulonghai3樓2015-03-12 15:34:12
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6樓2015-03-13 15:03:09
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7樓2015-03-13 15:22:34
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8樓2015-03-13 19:09:03
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